單細(xì)胞拉曼光譜技術(shù)實(shí)現(xiàn)耐藥菌快速檢測(cè)
近期,中科院蘇州生物醫(yī)學(xué)工程技術(shù)研究所(以下簡(jiǎn)稱蘇州醫(yī)工所)研究團(tuán)隊(duì)聯(lián)合浙江中醫(yī)藥大學(xué)等開展了單細(xì)胞拉曼光譜—重水標(biāo)記聯(lián)用技術(shù)的伊麗莎白菌屬細(xì)菌快速藥敏檢測(cè),相關(guān)研究文章發(fā)表于《微生物學(xué)前沿》。
單細(xì)胞拉曼光譜(SCRS)是一種重要的單細(xì)胞生物技術(shù),能夠在無標(biāo)記、無損的前提下揭示細(xì)胞固有的化學(xué)組成,可用于表征細(xì)胞類型、生理狀態(tài)和細(xì)胞功能,因此在單細(xì)胞研究中有廣闊的應(yīng)用前景。
此前,研究團(tuán)隊(duì)利用拉曼光譜—重水標(biāo)記聯(lián)用技術(shù)開發(fā)了一種適用于血液和尿液標(biāo)本的快速藥敏檢測(cè)方法(FRAST)用于檢測(cè)細(xì)菌的耐藥特性,相關(guān)研究成果發(fā)表于《分析化學(xué)》。其原理為:耐藥菌在抗生素作用下會(huì)持續(xù)代謝重水中的氘元素,通過顯微拉曼光譜可以檢測(cè)細(xì)菌代謝氘后在胞內(nèi)合成的含有碳-氘化學(xué)鍵的生物大分子,從而使不依賴于培養(yǎng)的單細(xì)胞水平的快速藥敏檢測(cè)成為現(xiàn)實(shí)。新的研究在此基礎(chǔ)上,將這種方法的應(yīng)用拓展到以伊麗莎白菌屬為代表的威克斯氏菌科病原菌。
伊麗莎白菌屬細(xì)菌是非發(fā)酵革蘭陰性桿菌,廣泛存在于自然環(huán)境中,可引起腦膜炎、菌血癥、肺部感染等疾病。伊麗莎白菌雖然不止一種常見細(xì)菌,并且只有患基礎(chǔ)疾病、長(zhǎng)期使用抗生素及免疫功能低下或缺陷等人群才容易感染,但是其對(duì)頭孢類、碳青霉烯類、氨基糖苷類等各種抗菌藥物均有很高的耐藥性,呈現(xiàn)多重耐藥,一旦感染則難以治療。因此研究伊麗莎白菌的耐藥特征,可以為臨床合理用藥有效控制感染提供依據(jù)。
使用FRAST檢測(cè)伊麗莎白屬細(xì)菌耐藥的方法為:具有代謝活性的伊麗莎白菌代謝氘元素后,其拉曼光譜中的C-H特征信號(hào)有一部分偏移產(chǎn)生C-D信號(hào),表現(xiàn)出明顯的拉曼峰,通過分析拉曼光譜中C-D峰和C-H峰的比值,即可判斷細(xì)菌在不同抗生素條件下的代謝活性,反映細(xì)菌藥敏情況。
與此前的拉曼光譜—重水標(biāo)記聯(lián)用技術(shù)研究相比,本次研究科研人員對(duì)該方法進(jìn)行了優(yōu)化,僅需檢測(cè)菌種的敏感、中介和耐藥的三個(gè)折點(diǎn)濃度下的代謝指數(shù)是否降至陰性對(duì)照的70%以下就能夠準(zhǔn)確判斷耐藥菌的耐藥特征,縮短了藥敏報(bào)告時(shí)間。
(資料來源:中國(guó)科學(xué)院蘇州生物醫(yī)學(xué)工程技術(shù)研究所)
關(guān)鍵詞: 拉曼光譜 伊麗莎白 生物醫(yī)學(xué)工程
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